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西部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院藥學(xué)部，在2021年發(fā)表文章到Cell Communication and Signaling的學(xué)術(shù)期刊中科研者使用美國(guó) Invigentech轉(zhuǎn)染試劑，高效率轉(zhuǎn)染原代破骨細(xì)胞前體細(xì)胞（Osteoclast precursor cells），具體轉(zhuǎn)染原代破骨細(xì)胞前體細(xì)胞方法經(jīng)驗(yàn)如下：（注意：本文轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中使用的細(xì)胞數(shù)量、試劑用量和操作方法不適用于傳統(tǒng)lipo3000轉(zhuǎn)染試劑或類似產(chǎn)品）。

Cell culture

Sorted primary CD115(+) precursors were cultured in α-minimal essential medium (MEM) containing 10% FBS,1% penicillin-streptomycin solution and 50 ng ml? 1 colony stimulating factor (M-CSF, Abcam). After 3 days,the medium was replaced with fresh medium. LA was added at a concentration of 100 μg/ml to stimulate the precursors. To inhibit the expression of Cadherin-11, the primary osteoclast precursors were transfected with Cadherin-11 siRNA using INVI DNA RNA Transfection reagent (Invigentech)for 24h. The sequence of Cadherin-11 siRNA was CCAATGGACCAAGATTTAT. In some experiments, primary cells were treated with BYL719 (2.5 μM), GSK690693 (25 nM), 666–15 (50 nM), rapamycin (20 μM), or AMG-487 (30 μM).

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